電泳技術是分子生物學研究不可缺的手段

　　事實證明，在科學飛速發展的今天，無論我們從事什么領域的研究，除了有良好的理論基礎外，更重要的是依靠先進的技術、優秀的儀器設備和良好的研究環境。除了一般生物實驗室的傳統儀器外，標準分子生物實驗室還有一些特殊用途的儀器。這些儀器通常精確且昂貴。以下是這些儀器的使用方法和注意事項。

　　一、冷凍離心機

　　低溫分離技術是分子生物學研究的重要手段?；蚱蔚姆蛛x、酶蛋白的沉淀和回收以及其他生物樣品的分離和制備實驗與低溫離心技術是不可分割的，因此低溫冷凍離心機已成為分子生物學研究的重要儀器。在中國，有許多制造商生產冷凍離心機，實驗室的高速冷凍離心機是GL-20G-Ⅱ類型(上海安亭)，落地式。配角轉頭:6.×50ml，12×10ml和12×1.5ml。極限轉速20000rpm。

　　1.安裝和調試

　　離心機應放置在水平堅實的地面上，距離至少10分鐘cm在通風良好的環境中，周圍空氣應為中性，無導電粉塵、易燃氣體和腐蝕性氣體，環境溫度應為0~30℃兩者之間，相對濕度小于80%。試運行前，打開蓋門，用手移動旋轉軸，輕巧靈活。只有在沒有異?，F象的情況下才能使用旋轉頭。轉子準確到位后，打開電源開關，然后用手按下門開關，然后按下操作鍵，旋轉后立即停止，觀察旋轉軸的轉向。如果逆時針旋轉正確，機器可以投入使用。

　　2.操作程序

　　(1)插入電源，待機指示燈亮；打開電源開關，調速定時系統數字管顯示的閃爍數字為機器工作速度的出廠設置，溫控系統數字管顯示此時離心腔的溫度。

　　(2)設置機器的工作參數，如工作溫度、工作時間、工作速度等。

　　(3)將預先平衡的樣品放在轉頭樣品架上，關閉機蓋。

　　(4)按下控制面板的操作按鈕，離心機開始運行。其運行速度在預設的加速時間內提高到預設值。

　　(5)離心機在預設的運行時間內(不含減速時間)開始減速，其速度在預設的減速時間內降至零。

　　(6)按控制面板上的停止鍵，數碼管顯示dedT，閃爍的速度值在幾秒鐘后顯示出來，這時機器已經準備好下一次工作了。

　　3.注意事項

　　(1)離心機應始終處于水平位置，外部電源系統的電壓要匹配，并且要求有良好的接地線，機器不使用，要拔掉電源插頭。

　　(2)開機前應檢查轉頭安裝是否牢固，機腔內是否有異物。

　　(3)離心筒離心時，應提前平衡樣品。

　　(4)揮發性或腐蝕性液體離心時，應使用帶蓋的離心管，并確保液體不泄漏，以免腐蝕機腔或造成事故。

　　(5)不要隨意改變機器的工作參數，除了工作溫度、運行速度和運行時間，以免影響機器的性能。速度設置不得超過最大速度，以確保機器的安全運行。

　　(6)如果使用中出現0.00或其他數字，如果機器不運行，應關閉機器并切斷電源。10秒后，重新啟動機器。設定的速度顯示后，按下操作按鈕，機器將照常工作。

　　(7)在機器運行過程中或轉子未停穩時，不得打開蓋門，以免發生事故。

　　(8)每次操作完成后，應做好使用記錄，并定期檢修機器的性能。

　　二、電泳儀

　　電泳技術是分子生物學研究不可或缺的手段。電泳一般分為自由界面電泳和區域電泳。自由界面電泳不需要支持，如等速電泳、密度梯度電泳和微電泳。目前，這種電泳很少使用。區域電泳需要各種類型的物質作為支撐。常用的支撐是濾紙、醋酸纖維膜、非凝膠支撐、凝膠支撐和硅膠―G在分子生物學實驗中，最常用的薄層等是瓊脂糖凝膠電泳。電泳可以用來定性或定量地分析不同的物質，或分析某些混合物或提取和制備單個組件。DYY-以12型電腦三恒多用電泳儀(北京六一儀器廠)為例介紹其使用方法。

　　1.使用方法

　　(1)根據電源開關，顯示屏出現“歡迎使用DYY-12型計算機三恒多用電泳儀表…”等字后，同時系統初始化，蜂鳴4聲，設置常設置。屏幕轉換成參數設置狀態，見圖1：

　　U:0V U＝100V｜Mode：STD

　　I:0mA I＝50mA｜

　　P:0W P＝50W｜

　　T:00:00 T＝01:00｜

　　其中：左邊大寫U:I:P:T:電泳實際值；程序的常設值(預設值)在中間部分顯示。Mode(模式)：STD(標準)；TIME(定時)；VH（伏時）；STEP（分步）

　　(2)設置工作程序。用鍵盤輸入新的工作程序。例如，需要工作電壓U＝1000V，電流I限制為200mA功率W限制在1000W時間T在3小時20分鐘內，輸出在到達時自動關閉。操作步驟如下：

　?、侔础澳Ｊ健辨I，標準工作模式（STD）轉為定時（TIME）

　　模式。每按模式鍵，其工作方式按以下順序改變：STD?TIME?VH?STEP?STD。

　?、谙仍O置電壓U，按“選擇”按鍵，先將其反向顯示，然后輸入數字鍵設置該參數的值。按1000的數字，然后設置電壓。

　?、墼O置電流I，按“選擇”先使I反顯示，然后輸入數字200。

　?、茉O置功率P，按“選擇”先使P反顯，然后輸入數字100。

　?、菰O置時間T，按“選擇”鍵，先使T反顯，再輸入數字320。如果輸入錯誤，可以按“清除”再次輸入鍵。

　?、薮_認每個參數正確后，按“啟動”按鍵，啟動電泳儀輸出程序。顯示在顯示屏狀態欄中Start!并發出4個聲音，提醒操作員電泳計將輸出高電壓，注意安全。然后逐漸將輸出電壓添加到設定值。同時，在狀態欄中顯示“Run”并且有兩個高壓符號不斷閃爍，表示端口有電壓輸出。實際工作時間（精確到秒）顯示在狀態欄底部。

　?、呙看螁虞敵鰰r，儀器會自動存儲此時的設置值“MO”存儲單元。以后需要調用的時候可以按“讀取”鍵，再按“0”鍵，按“確定”按鍵即可取出上次設置的工作程序。

　?、鄡x器顯示的電泳結束：“END”，并且連續蜂鳴提醒。此時按下任意一鍵即可止鳴。

　　2.注意事項

　　(1)U，I，P三個參數的有效輸入范圍是：U：5～3000V；I：4～400mA；P：4～400W.

　　(2)一般情況下，當No Load！首先要關機檢查電極線與電泳槽之間是否有接觸不良，可以用萬用表的歐姆檔逐段測量。

　　(3)如果輸出端連接到多個電泳槽，則儀器顯示的電流值為每個電池槽的電流之和，此時應選擇穩壓輸出，以減少每個電池槽的相互影響。

　　(4)注意保持儀器的清潔，不要遮擋儀器后方進風通道。嚴禁將電泳槽放在儀器頂部，避免緩沖液灑進儀器內部。

　　(5)本儀器輸出電壓較高，使用中應不避免接觸輸出回路及電泳槽內部，以免發生危險。

　　(6）長期不用儀器，應放置在干燥通風的清潔環境中保存。